目的:流式细胞仪开机程序、预设获取模式文件、设定和调整、样品分析、关机程序
一.开机程序
1.检查稳压器电源,打开电源,稳定5分钟。
2.打开储液箱,倒掉废液,
并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至4/5满(一般可用三蒸水,做分选必须用PBS或FACSFlow),合上压力阀。确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。
3.将FACSCalibur开关打开,此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY,预热5-10分钟。排出过滤器内的气泡。
4.如果需要打印,打开打印机电源。
5.打开电脑,等待屏幕显示出标准的苹果标志。
6.执行仪器PRIME功能一次,以排除Flow cell中的气泡。
7.分析样品时,先用FACAFlow 或PBS进行HIGH RUN约2分钟。
?做过分选后,每次开机后需冲洗管道:向分选装置上装上两个50ml离心管,不接通浓缩系统,摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置,同上法冲洗一次。
二.预设获取模式文件(Acquisition Template Files)
1.从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗,可利用此视窗编辑一个获取模式文件。
2.选取屏幕左列绘图工具中的Dot plot,绘出一个或多个Dot Plots(点图)。从Dot
Plot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源,并确定适当的x轴和y轴参数。
3.选取屏幕左列绘图工具中的Histogram,同上法可绘出Histogram(直方图)。
4.将此视窗命名后储存于FACStation G3BD Applications CELLQuest Folder
EXP文件夹中,下次进行相同实验时可直接调用。
?本计算机中已设定两个模式文件:ACQ和EXP,储存于FACStation G3BD Applications CELLQuest
EXP文件夹中,ACQ用于细胞DNA检测,EXP用于细胞表面标志分析。