在我国，胃癌仍为最常见的恶性肿瘤之一，约2/3患者就诊时已为中晚期’目前研究已i}l.实，进展期胃癌新辅助化疗可使肿瘤缩小、临床分期降低，从而提高胃癌的根治性切除率、减少术后复发转移。由于患者对不同化疗方案的敏感性不同，寻找可靠的化疗敏感性预测指标;旱期筛选出对化疗应答不敏感的患者.减少不必要的术前化疗，成为临床重要课题之一.针对于此，我们对进展期胃癌进行多基因免疫组化检测，从中筛选出可能对mFOLFOX7方案新辅助化疗敏感的预测因子，为胃癌的个体化治疗提供重要的依据.
资料与方法
一、临床资料
人组标准:(1)胃镜下活检确诊为胃癌;(2)术前分期且期以上的患者;(3)年龄大于18岁且小于70岁，并且katnofsky评分大于或等于70;(4)无化疗和手术禁忌;(5)无其他的恶性疾病，既往无胃部手术史;(6)化疗患者均签署知情同意书按上述标准选取2009年8月至2011年8月潍坊市人民医院肿瘤外科收治的53例术前病理学确诊的进展期胃癌患者，所有病例之前均未接受过任何治疗。其中男40例，女13例)年龄3369中位年龄59)岁二病变部位:胃窦部20例，胃体部16例，胃食管结合部17例。病理类型:中、低分化腺癌38例，印戒细胞癌9例，粼液腺癌及其他6例、初步临床分期:Il期19例，l期34例术前评价包括胸片，全腹平扫加强化双源螺旋CT检查，必要时扫描盆腔及胸腔，腹部超声，心电图，生化全项，全血细胞计数，肿瘤标志物等部分患者行超声胃镜(资料不全).
二、治疗方法
对所有人选患者行mFOLF'OX7双周方案化疗:奥沙利铂(L-OHP)100mg/m'-静脉滴注2h，第1天;亚叶酸钙(CF)400m}/m`静脉滴注2h.第1天;氟尿嚓咤(5-FU)2400mg/m=持续静脉泵人46h 2周后重复，共4周期化疗结束后4周行标准胃癌根治手术.
三、疗效评价标准
化疗前后以螺旋CT,胃镜及术后病理切片相结合的方法作为疗效判断的证据。新辅助化疗后原发病灶的疗效判定根据RECISTI.1标准评估，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)及疾病进展(PD);有效:PR加CR，无效:SD加PD病理完全缓解(pCR):手术标本中无癌细胞残留病理部分缓解(pPR):有单个或小癌灶残留;疗效小:残留癌灶伴纤维增生;疗效差:疗效微小或无疗效，广泛残余癌细胞。
四、各基因检测方法及结果判定
采用免疫组织化学(免疫组化)SP法和荧光原位杂交法(FISH)，所用试剂购自北京中杉金桥生物有限公司和ROCHE诊断产品有限公司。新辅助化疗前胃镜活检获取肿瘤组织，手术后切除标本分别予以检测，检测方法按试剂盒说明书进行。
C-met蛋白定位于胞质和胞膜，TOPO-II蛋白定位于胞核，阳性细胞均染成黄色或棕黄色颗粒，以阳性细胞所占百分率来表不。阳性细胞数小于25%r为阴性，阳性细胞大于或等于25%为阳性。
EGFR,HER-2蛋白定位于细胞膜，呈棕褐色，细胞膜未着色或阳性细胞数小于10%为(一)，大于或等于lOclc巨细胞膜不完整染色为(十)，两者均定为阴性。大于或等于10%且细胞膜完整轻至中度染色为(+十)，大于或等于10%且细胞膜完整的强染色为(+++)EGFR表达(++一十++)定为阳性。HER2表达(+++)为阳性，见图1;(++)为不明确，再进行FISH检测，若FISH为(+)则定为阳性，见图2。对于活检标本HER2以成簇的肿瘤细胞膜染色来评估，不管着色细胞百分比若染色为(++)同样进行FISH检测。P53和I}i67阳性染色呈棕黄色颗粒，均定位于细胞核。P53和hi67均以肿瘤细胞不着色或小于10%的肿瘤细胞着色为阴性，大于或等于10%的肿瘤细胞着色为阳性，见图3oMMP-7染色阳性反应为细胞浆中出 现淡黄色至棕褐色颗粒。
根据染色的强度及阳性细胞的面积判断结果。每张切片阳性细胞的染色强度按无着色、淡黄色、棕黄色和棕褐色分别计分为。,1,2,3分;按阳性细胞面积分别计分为0,1(1%}25%),2(26%}50%),3(51%}75%)和4(76%一100%)，据2项打分之积判断结果:0分为阴性，大于或等于1分为阳性。
五、统计学方法
采用SPSS16.0统计软件，用才检验、趋势才检验及Lo办stic多因素回归分析处理相关数据。
结果
一、新辅助化疗治疗情况及疗效
本组53例患者全部完成mFOLFOY7方案新辅助化疗，无中途退组者。总有效率为52.8%(28/53其中PR为52.8%(28/53),SD为45.3%(24/53),PD为1.9%(1/53)。不良反应均能耐受化疗结束4周后行胃癌DZ根治术，R。切除者45例，姑自、切除者8例。均无并发症出现。随访至今均生存.
二、各基因的表达与新辅助化疗疗效的关系
新辅助化疗前后，各因子的表达差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。新辅助化疗前，HER2阳性表达者化疗有效率为83.3%(10/12)，阴性表达者有效率为43.9%(18/41)，前者明显高于后者(P<0.05);P53阳性表达者化疗有效率为35.7%(10/28)，明显低于阴性表达者的72.0%(18/2s)(P<o.os);C-met,EGFR,Ki-67,MMP7及ToPO}的表达与化疗敏感性无关(P>0.05)。见表2oLogistic多因素回归分析显示，HER2和P53是化疗敏感性独立影响因素(P<0.05)，表3}
三、HER2和P53与新辅助化疗疗效的关系将HER2与P53的表达情况分为亚组，各亚组新辅助化疗疗效见表4。其中，6例患者HER2阳性，同时P53阴性表达，其新辅助化疗疗效均为有效，明显优于其他亚组患者，差异有统计学意义}X'=11.17，P=0.001)。
