在第五届国际转基因动物学术研讨会上,来自上海市农业科学院畜牧兽医研究所、上海市农业遗传育种重点实验室和上海第二医科大学的研究人员公布了他们合作进行的有关猪克隆研究的进展(论文的作者为张德福、王英、陈茵等)。
研究人员以卵丘细胞为核供体细胞组成重构胚,卵裂率达到56.7%,发育至桑椹胚达11.7%、囊胚率为6.7%,显著高于成纤维细胞重构胚。他们还研究了卵母细胞的采集方法、激活程序和卵龄对卵丘细胞核移植重构胚体外发育的影响。以血清饥饿法将卵丘细胞诱导至G0/G1期,抽吸法/解剖法采集卵母细胞,体外培养33/44h,将卵丘细胞放至去核卵母细胞的卵周隙中,重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6-DMAP激活处理,体外培养6天。
研究表明,卵母细胞采集方法、激活液中细胞松弛素(CB)、激活程序并不影响重构胚发育(以卵龄33h的卵母细胞为受体)。研究显示,以电脉冲结合6-DMAP激活卵丘细胞重构胚,体外能发育至胚囊。