方 佳 陈常庆 中国科学院上海生物工程研究中心,上海200233；
王德宝 中国科学院上海生物化学研究所,上海200031
摘要 将两种人肿瘤坏死因子(hTNF)受体hTNFR55和hTNFR75基因分别克隆到表达载体pcDNA3、pDR2以及pXJ-41中,以脂质体介导的方法转染BHK细胞,用［125I］TNF-α筛选出阳性克隆,并进一步鉴定了表达两种hTNFRs的细胞株；反转录(RT)-PCR和ELISA结果表明两种hTNFRs在RNA转录和蛋白质合成水平均获得了表达。但hTNF-α不能引发这些细胞株的细胞毒活性；结合野生型hTNF-α及其突变体R2K的细胞毒活性和体内毒性的测定结果,利用这些细胞株进一步测定了突变体hTNF-α-R2K和野生型hTNF-α分别与两种受体的竞争结合活性,从而为两种受体以及hTNF-α的结构和功能研究的进一步深入奠定了一定的基础。
关键词 人肿瘤坏死因子受体；表达；人肿瘤坏死因子α(hTNF-α)；结构功能
生物化学与生物物理学报 1999年 第31卷 第1期 Vol.31 No.1 1999
