生物通报道:致死性的埃博拉病毒(Ebola virus)在非洲是一种新出现的公共健康问题,这种病毒还可能被恐怖分子用作生物武器。由于这种病毒的毒性强而且目前还没有可用的疫苗,研究这种病毒的研究人员必须在严密的防备措施之下进行研究,因此研究被限制在少数高度专业化的实验室,从而影响了研究人员研制对付策略的能力。
现在,来自美国威斯康星-麦迪逊大学的一个研究组找到了一种在基因水平上解除这种病毒武装的方法,将其高效地限制在一套特化细胞中,从而使研究人员能够在比目前相当较为宽松的条件下安全地研究这种病毒。在1月22日的《PNAS》杂志上,研究人员描述了这种容纳病毒的系统。
埃博拉病毒引起的疫情在1976年首次在苏丹和扎伊尔爆发。目前发现有几种病毒株,该病毒能导致出血性发热,并且在爆发期间杀死了50-90%的感染者。
Kawaoka和他的同事设计出的这种系统能够提供一种对这种病原物进行扩大研究并加速对付方法研发的途径。
根据这项新研究,驯服这种病毒依靠一个叫做VP30的单个基因。与大部分的病毒类似,埃博拉病毒也是一个“基因乞丐”,它只有8个基因,依靠寄主细胞提供复制自己所需的很多分子机器。这种病毒的VP30基因制造一种能够使它在寄主细胞中得以复制的蛋白质。没有这种蛋白质,这种病毒就不能生长。
这种经改造的病毒在任何正常细胞中都不能生长。研究人员制备了表达VP30蛋白的细胞,这种病毒能够生活在这些细胞中,因为细胞能提供它们这种丢失蛋白。研究人员花费了数年的时间寻找对细胞无毒性的病毒蛋白并用于开发一种使用了猴子肾脏细胞的系统来限制病毒。
研究人员表示,这种系统能够用于药物筛选和疫苗研制。目前,活埃博拉病毒只能在四级生物安全水平(BSL4)的实验室进行研究。任何在较低安全水平的实验室研究这种病毒的建议都铁定引发争议。
使这种病毒能够在更多的实验室进行研究对抵抗这种病毒至关重要。近期,在乌干达发现了一种新的埃博拉病毒株。研究人员表示,这种新出现的病毒的毒性非常高,目前已经导致40人死亡。但是由于BSL4的要求,到目前为止对这种病毒的了解还非常少。
埃博拉病毒是人类迄今为止所发现的死亡率最高的一种病毒,死亡率在50%至90%之间。世界卫生组织公布的最新数字说,自1976年发现这一病毒以来,全世界的感染者已达1500多例,其中已有1000多人死亡。
埃博拉病毒是一种十分罕见的病毒,这种病毒最早是于1967年在德国的马尔堡首次发现的,但当时并没有引起人们的注意。1976年在苏丹南部和扎伊尔即现在的刚果(金)的埃博拉河地区再次发现它的存在后,才引起医学界的广泛关注和重视,埃博”由此而得名。
埃博拉病毒的形状宛如中国古代的“如意”,极活跃,病毒主要通过体液,如汗液、唾液或血液传染,潜伏期为2周左右。感染者均是突然
出现高烧、头痛、咽喉疼、虚弱和肌肉疼痛。然后是呕吐、腹痛、腹泻。发病后的两星期内,病毒外溢,导致人体内外出血、血液凝固、坏死的血液很快传及全身的各个器官,病人最终出现口腔、鼻腔和肛门出血等症状,患者可在24小时内死亡。
埃博拉病毒的传染除了通过血液和人体分泌液传染外,接触被病人血液污染的医疗用具也有可能被传染。而且这种病传染极快,所有病人一旦被发现就必须立即被隔离,与病人接触过的人也必须接受定期检查。目前,全球医学界还没有找到预防这种病的疫苗和可以治愈这种疾病的药物。但只要及时采取控制措施,严格隔离病发区,病毒的传染就能得到迅速遏制。
埃博拉共有4种亚型。两种分别命名为EBO-Z(Ebola-Zaire,埃博拉-扎伊尔)和EBO-S(Ebola-Sudan,埃博拉-苏丹)在1976年被确认。相对于扎伊尔亚型的90%的死亡率,在苏丹爆发的埃博拉亚型的死亡率较低,约为50%。1990年,相似的病毒在从菲律宾进口到Reston,Virginia的猴子中发现。这种病毒被命名为Ebola-Reston。更进一步的爆发发生在刚果扎伊尔(1995年和2003年),加蓬(1994年,1995年和1996年)以及在乌干达(2000年)。1994年在象牙海岸人体个别案例上发现一些病毒的变种
生物谷推荐原始出处:
Published online before print January 22, 2008
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 10.1073/pnas.0708057105
APPLIED BIOLOGICAL SCIENCES
Generation of biologically contained Ebola viruses
Peter Halfmann*, Jin Hyun Kim*, Hideki Ebihara,, Takeshi Noda, Gabriele Neumann*, Heinz Feldmann, and Yoshihiro Kawaoka*,,,¶
*Department of Pathobiological Sciences, School of Veterinary Medicine, University of Wisconsin, Madison, WI 53706; Division of Virology, Department of Microbiology and Immunology, and International Research Center for Infectious Diseases, Institute of Medical Science, University of Tokyo, Tokyo 113-0033, Japan; and Special Pathogens Program, National Microbiology Laboratory, Public Health Agency of Canada and Department of Medical Microbiology, University of Manitoba, Winnipeg, MB, Canada R3E 3R2
Edited by Peter Palese, Mount Sinai School of Medicine, New York, NY, and approved December 12, 2007 (received for review August 25, 2007)
Abstract
Ebola virus (EBOV), a public health concern in Africa and a potential biological weapon, is classified as a biosafety level-4 agent because of its high mortality rate and the lack of approved vaccines and antivirals. Basic research into the mechanisms of EBOV pathogenicity and the development of effective countermeasures are restricted by the current biosafety classification of EBOVs. We therefore developed biologically contained EBOV that express a reporter gene instead of the VP30 gene, which encodes an essential transcription factor. A Vero cell line that stably expresses VP30 provides this essential protein in trans and biologically confines the virus to its complete replication cycle in this cell line. This complementation approach is highly efficient because biologically contained EBOVs lacking the VP30 gene grow to titers similar to those obtained with wild-type virus. Moreover, EBOVs lacking the VP30 gene are indistinguishable in their morphology from wild-type virus and are genetically stable, as determined by sequence analysis after seven serial passages in VP30-expressing Vero cells. We propose that this system provides a safe means to handle EBOV outside a biosafety level-4 facility and will stimulate critical studies on the EBOV life cycle as well as large-scale screening efforts for compounds with activity against this lethal virus.
antiviral screening | reverse genetics | vaccine development