微生物学报Acta Microbiologica Sinica
48(3)：299~303; 4 March 2008
基金项目: 国家..973 项目”(2006 CB504404); 国家自然科学基金(30425031)
*通讯作者。Tel: +86-514-87971136; Fax: +86-514-87311374; E-mail: xajiao@yahoo.com
作者简介: 殷月兰(1971. ), 女, 山东青岛人, 副教授, 博士, 研究方向为畜禽重要疫病发病机理和免疫机理。
E-mail: lanyy31@yahoo.com.cn
收稿日期: 2007-09-20; 修回日期: 2007-11-23
ISSN 0001-6209; CN11-1995/Q
殷月兰, 朱国强, 耿士忠, 胡茂志, 焦新安*
(扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室, 扬州 225009)
摘要：产单核细胞李斯特菌的毒力因子与该菌在细胞间扩散、传播有着直接的关系, 其中肌动蛋白聚集因子ActA 是细菌由细胞浆扩散至相邻细胞所必须的因子, 而广谱磷脂酶C则参与具有双层膜吞噬体的裂解过程。[方法]本研究中利用同源重组技术成功构建了毒力因子ActA 和 PC-PLC 双缺失的突变株, [目的]并对突变株的毒力和免疫应答潜能进行评价。[结果]Western blot 和磷脂酶活性测定实验, 分别从蛋白质水平上证实actA 和plcB 基因的缺失。突变株的毒力显著降低, 对小鼠半数致死剂量比野生型菌株提高约103 倍, 但仍然保持较好地诱导T 细胞应答的能力, 并且能完全保护野生型细菌致死剂量的攻击。实验结果不仅表明ActA 和 PC-PLC 是产单核细胞李斯特菌的重要毒力因子,而且证实安全性提高的突变株依然保持有较强地诱导细胞免疫应答的能力。[结论]因此, 该突变株的获得不仅对李斯特菌病的预防具有重要作用, 而且为构建预防人类和动物疫病的疫苗载体奠定了基础, 此外对于阐明LM 毒力因子的致病机理与免疫保护作用提供了条件。
中图分类号：Q936 文献标识码：A 文章编号：0001-6209 (2008) 03-0299-05
产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种胞内寄生菌, 人兽共患李斯特菌病的病原,感染后发病死亡率约为25%[1~2]。欧美国家曾多次暴发流行, LM 对食品的污染与危害, 已引起世界各国的普遍关注和高度重视, 其中研制预防李斯特菌病的减毒活疫苗是重要的课题之一[3]。另外, LM 所具有的独特免疫应答机制使它成为一种非常具有吸引力的运送异源抗原的疫苗载体[4~6]。目前研究表明, 通过毒力基因缺失的方法可使LM 毒力降低, 但毒力降低不显著, 安全性得不到有效的保障。actA 和plcB 基因的编码产物ActA 和PC-PLC 是与LM 致病性相关的主要毒力因子, actA 编码的表面蛋白ActA 在LM 胞内运动中起着重要作用, 能产生一种使肌动蛋白聚合的因子, 诱导LM 一极的肌动蛋白的聚合,以促进LM 在宿主细胞内的极向运动[7]。基因plcB 编码广谱磷脂酶C(PlcB), 在吞噬泡双层膜溶解中起作用[8]。本研究通过同源重组的方法从基因组中缺失这两个基因,并对突变株的生物学特性进行了初步研究。
全文下载：产单核细胞李斯特菌actA/plcB 缺失株的构建及其生物学特性
更多全文请查看链接：http://journals.im.ac.cn
声明：本文由《微生物学报》授权生物谷 www.bioon.com 网站发布，如需转载请直接与中国科学院微生物研究所期刊联合编辑部联系并支付相应费用，未经授权不得转载，若转载将付相应的法律责任。
