微生物学报Acta Microbiologica Sinica
48(7)：874~878;4 July 2008
梁楠1,2，王淼2，刘立明1*，堵国成1，陈坚1*
(1工业生物技术教育部重点实验室，2江南大学食品学院，无锡214122)
摘要：【目的】为了了解光滑球拟酵母中乙酰辅酶A含量对其碳代谢及其通量的影响。【方法】将来源于酿酒酵母中编码乙酰辅酶A合成酶ACS2基因过量表达于发酵法生产丙酮酸的生产菌株Torulopsis glabrata中，获得了一株乙酰辅酶A合成酶活性提高9.2倍(1.20 U/mg protein)的重组菌T.glabrata ACS2-1。【结果】与出发菌株WSH-IP303相比，重组菌T.glabrata ACS2-1：(1)能以乙酸为唯一碳源在胞内积累0.94 mmol/(L·g DCW)的乙酰辅酶A；(2)以葡萄糖为唯一碳源时胞内乙酰辅酶A浓度、α-酮戊二酸产量和Cα-KG/Cpyr是出发菌株WSH-IP303的3.22、2.05和2.52倍；(3)在葡萄糖培养基中添加4 g/L乙酸，使乙酰辅酶A浓度、α-酮戊二酸产量和Cα-KG/Cpyr是出发菌株WSH-IP303的4.55、2.47和3.75倍，α-酮戊二酸浓度达到17.8 g/L。【结论】这一结果表明，改变细胞内关键辅因子的浓度能使碳代谢流的流向与通量发生改变，从积累丙酮酸转向过量积累α-酮戊
二酸。
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