微生物学报Acta Microbiologica Sinica
48(8)：995～1000; 4 August 2008
基金项目: 国家自然科技资源平台项目(2005DKA21201); 中国石化集团重点基础研究项目(P06071-3)
*通讯作者。Tel/Fax: +86-28-85258573; E-mail: zhanghuits@yahoo.com.cn
作者简介: 黎霞(1979. ), 女, 四川德阳人, 硕士研究生, 主要从事能源微生物研究。E-mail: xiaxiali@yahoo.com.cn
黎霞1，承磊1，汪卫东2，邓宇1，尹小波1，张辉1*
(1 农业部沼气科学研究所，成都 610041)
（2 中国石化胜利油田采油工艺研究院，东营 257000）
摘要：【目的】了解油藏环境中细菌的生理生化特性及代谢产物。【方法】采用Hungate 厌氧操作技术从胜利油田罗801 区块油层采出水中分离到一株厌氧杆菌SC-2。采用生理生化鉴定结合16S rDNA序列的系统发育学分析确定该菌株的系统发育地位，用气相色谱分析其代谢产物。【结果】菌株SC-2为严格厌氧的革兰氏阴性杆菌，菌体大小为0.38 μm×1.7 μm~3.9 μm，单生、成对或成串生长，产端生芽孢。温度生长范围40℃~75℃（最适温度70℃）；pH 范围5.5～9.5（最适pH 6.5）；NaCl 浓度范围0%～5%（最适NaCl 浓度0%）。能够利用葡萄糖、麦芽糖、甘露糖、木糖等多种碳水化合物，发酵葡萄糖的产物是乙醇、乙酸、丙酸、H2、CO2 及少量的乳酸。菌株SC-2 的（G+C）mol%含量为30.8%，与Thermoanaerobacter mathranii subsp. mathranii 的16S rDNA 序列相似性为99.85%。菌株利用葡萄糖产乙酸、乙醇的最佳初始pH 为8.0；酵母粉能刺激生长并显著提高发酵葡萄糖的产酸、产醇率；培养基中添加4%（V/V）的乙醇能明显抑制菌体生长。【结论】菌株SC-2 是从特殊生境（油层采出水）中分离到的一株嗜热、耐盐的厌氧菌，其发酵葡萄糖产生的代谢产物有利于改善油藏中的微环境。菌株SC-2 与T. mathranii subsp. mathranii 11426T 的最适pH 和最大耐受NaCl 浓度有所不同，且二者的（G+C）mol%含量差异较大。
关键词：热厌氧细菌；鉴定；产酸、产醇特性
中图分类号：Q939 文献标识码：A 文章编号：0001-6209 (2008) 08-0995-06
油藏是个特殊的缺氧生境，具有独特的理化特征（温度、盐度、pH）[1]。根据生理特性可将油藏中的厌氧微生物分为发酵细菌（Fermentative bacteria）、硝酸盐还原菌（Nitrate-reducing bacteria）、铁还原菌（Ironreducing bacteria）、硫酸盐还原菌（Sulphate-reducing bacteria）和产甲烷古菌（Methanogenic archaea）[2]。嗜
热发酵细菌广泛分布于不同条件的油藏环境中[3]，大多数的嗜热发酵细菌属于嗜热厌氧杆菌科（Thermoanaerobiaceae）和热袍菌目（Thermotogales），其中嗜热厌氧杆菌科包括了热厌氧杆菌属（Thermoanaerobacter）和嗜热厌氧杆菌属（Thermoanaerobacterium）。热厌氧杆菌属（Thermoanaerobacter）是一类能利用碳水化合物的异养嗜热菌[4]，目前分离到的热厌氧杆菌共有17 个种和5 个亚种。其中分离自油藏环境的共有3 个种， 即1995 年L'Haridon 等分离到的Thermoanaerobacter thermohydrosulfuricus[5]，Cayol 等分离的Thermoanaerobacter brockii subsp. lactiethylicusSEBR 5268 T [6]。Fardeau 等分别于2000 年和2004 年分离到Thermoanaerobacter subterraneus SEBR 7858T、SL9和OCA1[4,7]。菌株SC-2 是首株分离自国内油藏的热厌氧杆菌， 能利用葡萄糖产生乙醇、乙酸、丙酸、H2、CO2 及少量的乳酸。
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