微生物学报Acta Microbiologica Sinica 48(10)：1314~1318; 4 October 2008
中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128自体诱导物合成
酶基因的克隆及对生理功能的影响
曲媛，杨梦华，郑会明，钟增涛*，朱军
(南京农业大学生命科学学院，农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，南京 210095)
摘要：【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128中克隆自体诱导物合成酶基因，从而研究该基因在Sinorhizobium sp. 1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法，从中华根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128中克隆自体诱导物合成酶基因；利用大肠杆菌异源表达、C18反相薄层层析(TLC)的方法研究该基因的特性；通过中间片段融合的方法缺失该基因，并通过结瘤实验研究该基因对Sinorhizobium sp. 1128生理功能的影响。【结果】以草木樨中华根瘤菌Sinorhizobium medicae WSM419自体诱导物合成酶基因Smed_1560序列设计引物，通过PCR扩增在Sinorhizobium sp. 1128中寻找到一新的自体诱导物合成基因，命名为traI2。该基因在大肠杆菌Escherichia coli DH5 中表达后能产生两种自体诱导物分子。在Sinorhizobium sp.1128中将该基因缺失，自体诱导物活性下降；回复突变后，自体诱导物活性得到恢复，结瘤实验结果表明该基因能影响根瘤菌的结瘤效率。【结论】中华根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128群体感应系统是一个复杂的交互系统，它对结瘤的生理功能具有一定的影响。
关键词：Sinorhizobium sp. 1128；群体感应；自体诱导物合成酶
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