Enhancement by FK506 of Triptolide-induced Inhibition of Expression of COX-2 and iNOS in Human Rheumatoid Arthritis Synovial Fibroblasts
姚航平 邵雪婷 孙文佶 邵传森 张立煌
摘 要：研究了FK506对雷公藤内酯醇抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖和表达环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及合成前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)的影响, 探讨了FK506联合雷公藤抗类风湿作用的机制.分离培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞, 用不同浓度的FK506处理后, 加或不加雷公藤内酯醇(TP)和TNFα, 分别用[3H]-TdR法、竞争ELISA和硝酸酶还原法、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、细胞酶免疫法及Western印迹法检测滑膜细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE2和NO的水平、滑膜细胞COX-2和iNOS mRNA表达水平及蛋白质表达水平.同时提取各组细胞蛋白质, 测定其核转录因子NF-κB活性.结果表明, FK506(10～1000 nmol/L)及低浓度的TP(10 μg/L)单独对TNFα活化的RASF表达COX-2、 iNOS及合成PGE2、 NO均无明显的抑制作用; FK506与低浓度的TP联合作用后, 对活化的RASF具有不同程度的抑制作用, 并与联合的FK506浓度(10～1000 nmol/L)呈明显正相关性, 且两者联合对TNFα激活的RASF核转录因子NF-κB活性有明显的抑制作用.实验未观察到FK506对TP抑制滑膜细胞增殖的影响.以上结果说明, FK506可显著增强TP对滑膜细胞COX-2和iNOS的表达及其产物PGE2和NO合成的抑制作用, 这种作用可能通过增强TP对核转录因子NF-κB活性的抑制作用而实现.
关键词：FK506; 雷公藤内酯醇; 关节炎, 类风湿; 环氧化酶-2; 诱导型一氧化氮合酶
分类号：R593 文献标识码：A
基金项目：国家自然科学基金资助项目(No.39800135)
作者简介：姚航平,联系人: Tel, 0571-87217314; e-mail, yaohp2001@yahoo.com.cn
作者单位：姚航平（浙江大学医学院免疫学研究所,杭州,310031）
邵雪婷（浙江大学医学院附属第一医院,杭州,310003）
孙文佶（浙江大学医学院免疫学研究所,杭州,310031）
邵传森（浙江大学医学院免疫学研究所,杭州,310031）
张立煌（浙江大学医学院免疫学研究所,杭州,310031）
