杨劲松(上海第二医科大学生化教研室、分子生物学实验室、人类基因治疗研究中心,上海,200025)
郑新民(美国康奈尔大学, 纽约,14850)
陈诗书(上海第二医科大学生化教研室、分子生物学实验室、人类基因治疗研究中心,上海,200025)
摘 要:利用蛋白质酪氨酸磷酸酶α (PTPα)基因转染NIH3T3细胞, 研究PTPα诱导前后细胞生物学行为的变化, 为肿瘤形成早期机制的研究提供细胞模型. 用携带PTPα基因的四环素调控体系转染NIH3T3细胞并诱导24 h后, 用RT-PCR和蛋白质印迹法证实PTPα在诱导细胞中的表达高于未诱导细胞, 用RT-PCR及蛋白质印迹法发现内源性Src的表达水平在诱导与未诱导细胞中没有变化, 而Src激酶的活性在诱导细胞中增高, 并且在诱导细胞中Src的酪氨酸磷酸化水平降低. 再用透射式电子显微镜和流式细胞技术观察到诱导细胞的表型已发生变化, 实验结果表明PTPα诱导24 h使细胞的表型开始发生转化, 这种变化很可能与PTPα表达水平升高使Src C末端的pTyr527去磷酸化而激活Src相关.
关键词:PTPα; Src ; 转化
分类号:Q51 文献标识码:A
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