李孟森（海南医学院生物化学教研室,海口,571101）
李平风（北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083）
李刚（北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083）
杜国光（海南医学院生物化学教研室,海口,571101）
摘 要：为探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP)对肿瘤细胞增殖的促进作用. 用从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的HeLa细胞, 通过MTT计数、 [3H]-TdR参入法、流式细胞仪等研究细胞增殖, 并用放射免疫法测定细胞内cAMP、共聚焦显微镜扫描细胞内Ca2+浓度等观察细胞内第二信使物质的改变及测定32P转移反映细胞内蛋白激酶A(PKA)活性; 用Western 印迹分析法分析突变型p53、 p21ras蛋白表达. 结果显示AFP(浓度大于10 mg/L)对HeLa细胞增殖有明显的促进作用. 在AFP(20 mg/L)作用下, HeLa细胞cAMP浓度升高300%; Ca2+浓度最大升高154.9%、 PKA活性最大升高100%. 突变型p53和p21ras 分别增高81.1%(24 h)和96.2%(24 h). 抗甲胎蛋白单克隆抗体能有效地阻断AFP促HeLa细胞增殖作用. 以上表明, (1)AFP具促HeLa细胞增殖的生理功能; (2)AFP促进HeLa细胞增殖的作用是通过影响细胞内cAMP和Ca2+浓度以及PKA活性进而促进一些原癌基因的表达来实现的.
关键词：甲胎蛋白; 细胞增殖; 信号转导; 基因表达
分类号：R979.1 文献标识码：A
