生物谷报道:神经元是一种相当复杂的细胞类型。构建出神经元的分子组织模型对研究神经元的功能机制具有重要的意义。但是,要想构建一种神经元分子组织定量模型就必须先获得个体突触上蛋白质分子数量的信息。
由日本东京医科齿科大学医学院细胞生物学系的Yoshiko Sugiyama领导的一个由多个日本高校研究人员参与的研究组开发出了一种通过测量带有单个EGFP分子的微球体的荧光强度来估计兴奋性突触上个体蛋白质绝对数量的方法。研究结果公布在8月23日出版的Nature Method上。
在培养的海马神经元中,研究人员观察到在神经元分化和之后稳定化期间每个单独的突触中突触后蛋白数量的一种持续性的增加。到成熟期,他们计算出一个单独的兴奋性突触后位点含有100至450个个体突触后蛋白,包括PSD-95、GKAP、Shank和Homer。
这种窄范围的突触后蛋白内容物意味着相对简单的后突触分子组成。这种基于EGFP的测量技术则为人们提供了一种空前的、用于估计大分子复合体中蛋白质量的通用方法。
原文出处:
Sugiyama Y, Kawabata I, Sobue K, Okabe S.Determination of absolute protein numbers in single synapses by a GFP-based calibration technique. Nat Methods. 2005 Sep;2(9):677-684