1996年,克隆羊多莉的诞生,震惊了世界——大家终于知道,原来地球上的哺乳动物可以“无性繁殖”。如今,“克隆”已算不得新鲜,克隆羊、克隆牛等克隆动物越来越多。在我们身边,南京农业大学就有一支优秀的克隆团队,他们在山东的基地已经试验了两年。今年4月份,4只带有人乳铁蛋白基因的克隆小羊羔成功诞生,目前身体状况健康良好。与一般奶山羊相比,它们只有“妈妈”,没有“爸爸”。专家表示,将来人们有望喝上“人乳化”的羊奶。
“代孕母亲”产4只克隆母羊
4月8日,山东克隆羊基地内,有一群人无法入眠,围着几只怀孕的山羊团团转。“其中一只山羊有难产迹象,大家都很着急。”南京农业大学动物胚胎工程技术中心主任王锋教授是这支克隆团队的带头人。王锋表示,由于羊不会说话,所以只能拿听筒听它肚子里的动静,拿体温计量一量体温是否正常,“最好让它自然生产。”
“如果给羊剖腹产,动作会比较大,母羊能否存活是个问题。而且剖腹产后,小羊羔就很难有母乳吃了。”王锋的团队一直守到了凌晨1点多钟,母羊费了好大劲,终于顺产下了一只雌性克隆小羊羔,体重近3公斤,“母女”平安。“之后喜事不断,早晨6点多,又有一只代孕母山羊成功生下了一只克隆小羊。”
说起克隆小羊羔,王教授一脸自豪。从4月8日以来,他们已经成功培育了4只转基因克隆小羊,这4只小羊一身洁白,耳朵高高向上翘着,看上去十分可爱。小羊们分别叫欣欣、周周、万万、刚刚。“都是根据我学生的名或姓选一个字重叠命名的。”与一般山羊不同,这4只小羊虽然也是从羊妈妈肚子里生出来的,但生它们的妈妈只是“代孕母亲”,而且是通过克隆技术获得的,它们一出生身体还带了一种特殊基因:人乳铁蛋白。
小羊的“亲妈”远在陕西
欣欣、周周、万万、刚刚没有爸爸,只有“亲本”。它们的“亲妈”(也可称为“亲姐”),是一只1岁多的纯种雌性萨能奶山羊。去年7月,王锋教授的团队去陕西杨凌采取供体细胞的时候,这只奶山羊才几个月大。这位“亲妈”并不知道,当它还在童年时,耳朵上的一块皮肤组织已被科研人员取走,经过细胞培育等处理,在遥远的异乡生出了与自己长得一模一样的奶山羊。
王锋说,这4只转基因克隆羊除携带有人为转入的人乳铁蛋白基因外,其它基因与那只遥远的“亲妈”是一样的,均具有“高贵的血统”,是纯种萨能奶山羊。虽然它们是真正意义上的“母女关系”,但或许一辈子也见不上面,因为孕育的任务是由血缘上无任何联系的代孕母亲完成的。
虽然与自己的长相不一样,但代孕母羊照样呵护这些转基因克隆小羊羔,喂它们乳汁,让它们在自己面前撒欢。在王锋提供的照片里,转基因克隆小羊和代孕母羊长相差别很大。代孕母羊大耳朵下耷,而转基因克隆小羊耳朵小而上翘,浑身雪白晶晶亮,与代孕妈妈一点也不像;倒是与“亲妈”萨能奶山羊看起来是一个模子里刻出来的。
“代孕母羊都是当地品种的普通山羊,都是从当地农户手里买回来的,一般要提前一个月买回来,对它们进行调理,让它们养养身体。”王锋说,“代孕母羊”只是被借用了子宫,经胚胎移植生出后代,而两者遗传上没有任何关系。
“母乳”不够喝,还有牛奶喂
实际上,欣欣、周周、万万、刚刚并不是王锋团队培育的第一批转基因克隆奶山羊。去年9月,山东转基因克隆山羊基地就诞生了一只克隆小羊,那只小羊还没有命名就中途夭折,“它在1个月左右大的时候,在外面和大羊玩,被大羊蹬了一脚,导致眼部感染,救治无效死亡。死亡的时候它已经长到20多斤,我们把它做成了标本。”
王教授说,从去年到现在,陆陆续续已经流产或出生了10多只克隆羊羔。有的转基因克隆小羊一出生体质就很弱,最小的一只出生两天就死了。“这些死掉的转基因克隆小羊,农业部有安全规定,不能吃不能卖,不可以随便处理,我们都是深埋掉的,目前存活的只有这4头。”
因此,这4只转基因克隆小羊羔,刚出生就被精心呵护起来,每一只羊羔的耳朵上都有“标识”,喂养待遇和普通小羊羔也不一样。“它们一生出来,我的学生都把它们当宝贝疙瘩,怕被代孕母羊不小心伤到。要是看母乳不够,就给它们喂牛奶。”王锋说,这4只转基因克隆小羊已经快断奶了,目前都很健康,每只有八九公斤重。
培育克隆羊要走“四部曲”
从1996年,世界上第一头“克隆羊”多莉诞生至今,无性繁殖的克隆技术已渐渐揭开它的神秘面纱。不过,王锋教授坦言,克隆技术看似简单,其实每一步风险都很大,每一步操作起来难度都很大。现在全世界克隆成功率也比较低,仅为5%—10%左右。“要是这些克隆小羊与代孕母羊长相一致,那就不对了。克隆小羊与萨能奶山羊长相一致才是对的。”王锋说,克隆是一种高级的嫁接技术,大致可分为四步。
[第一步]在萨能奶山羊的耳朵上取耳皮肤成纤维细胞,取了细胞以后,要立刻赶回实验室内进行细胞培育,供核细胞用。这期间要把目的基因转入,即:人乳铁蛋白注入山羊基因组中,经基因转染、细胞筛选等,得到阳性细胞。