超氧化物歧化酶(SOD能够催化超氧阴离子(O2?-歧化。
为了测定SOD活性,研究人员尝试了许多间接的或者直接的方法,其中,NBT间接法最为常用,因为它很方便。但是NBT法有几个缺点,例如生成的染料水溶性差,而且会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochromC法也常被用来做SOD检测,但它和超氧化物反应过于剧烈,不能测定低水平的SODSODAssaiKit-WST®使用了Dojindo自己发明的易溶于水的噻唑盐:WST®-12-4-碘苯基)-3-4-硝基苯基)-5-2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐)能够和超氧阴离子反应生成水溶性的染料,因此可以简便地进行SOD检测。WST®-1与超氧阴离子反应的剧烈水平比cytochromC小70倍;因此,检测灵敏度非常高,并且能够通过将样品用buffer稀释,使背景的吸光度最小化。WST®-1不会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应,因此,能够检测SOD100%抑制率。WST®-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关,并且会被SOD所抑制(见下图)因此,SOD或者SOD类似物的IC5050%抑制浓度)就能用比色法来测定。
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