免疫组织化学方法/基本原理/步骤
（一）酶标记抗体组化法
酶标抗体技术是通过共价键将酶连接在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位，根据酶标记的部位可将其分为直接法（一步法）、间接法（二步法）、桥联法（多步法）等，用于标记的抗体可以是用免疫动物制备的多克隆抗体或特异性的单克隆抗体，最好是特异性强的高效价的单克隆抗体。直接法是将酶直接标记在第一抗体上，间接法是将酶标记在第二抗体上，检测组织细胞内的特定抗原物质。目前通常选用免疫酶组织化学间接染色法。
（二）葡萄球菌蛋白A（SPA）免疫检测技术
葡萄球菌蛋白A（SPA）是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质，由于它的一些免疫学特性，使其成为免疫学上一种极为有用的工具。葡萄球菌蛋白A（SPA）免疫检测技术是根据它能与多种动物IgG的Fc 端结合的原理，用SPA标记物（酶、荧光素、放射性物质等）显示抗原与抗体结合反应的各种免疫检测实验。
SPA 具有和人及多种动物如豚鼠、兔、猪、犬、小鼠、猴等 IgG 结合的能力，可解决不同动物检测时，需分别标记相对应的二抗的问题。 SPA结合部位是Fc段，这种结合不会影响抗体的活性。 SPA具有的结合力是双价的，每个SPA分子可以同时结合两个IgG分子，也可一方面同IgG相结合，一方面与标记物如荧光素、过氧化物酶、、胶体金和铁蛋白等相结合。但需注意的是SPA 对 IgG 免疫球蛋白亚型的结合有选择性，如SPA与人IgG亚型：IgG 1、IgG 2和IgG 4有结合力，唯独不结合IgG 3。只结合IgA 2 ，而不结合 IgA 1。SPA与禽类血清IgG不结合。因此应注意可能出现的假阴性结果。SPA 常用 HRP 标记，可应用于间接法。
