医用高压灭菌器工作原理及参数
1 材料和方法
1.1 材料 该灭菌器体积为520mm×560mm×330mm,内腔为300mm×500mm×240mm,腔体上、下层分别装有6支和8支强光灯管电压220V、功率2.25kW,在上、下贴近光源处安装涂有远红外涂料的金属网,距下层红外金属网30mm处有一不锈钢载物架,被消毒物品放置其上,箱内温度由微电脑进行控制。
1.2 方法 根据国家卫生部1999年颁布的5消毒技术规范6第三版第一分册实验技术规范,灭菌与消毒器械杀灭微生物效果鉴定实验技术进行灭菌实验。试验菌为枯草杆菌黑色变种ATCC9372芽胞,由军事医学科学院微生物流行病研究所提供。用0.03mol·L-1磷酸盐缓冲液稀释成菌量为1×10 8~5×10 8cfu·mL-1的菌悬液,菌悬液中含1%蛋白胨,用1mL微量注射器6号针头吸取适量菌悬液滴染下列物品每载体滴染0.01~0.02mL:经脱脂灭菌的不锈钢圆片直径15mm;将止血钳、镊子、卵圆钳等切割成段,经脱脂灭菌后的头部锯齿处;经脱脂灭菌后的止血钳关节闭合处;经脱脂灭菌后的骨科钳的关节闭合处。滴染菌液后用灭菌L棒涂匀,置37℃温箱30min。
1.3 灭菌处理 开机预热15s,使腔内初始温度为60~70℃,将10把止血钳平铺于载物架上,使灭菌器处于满载状态,在载物架不同位置布放染菌载体,设置灭菌温度和保温时间,启动工作开关并记录升温时间,灭菌试验结束即刻取出染菌载体于无菌室内进行接种。
1.4 接种、培养不锈钢片、器械头用无菌镊夹取后直接接种于营养肉汤管中。对止血钳!骨科钳用无菌棉拭子沾取营养肉汤于染菌处反复涂擦采样,再将棉拭子折断于肉汤管中。37℃温箱培养逐日观察至第7天记录结果。以阴性对照未接种载体肉汤管不长菌,阳性对照载体置室温下肉汤管长菌,试验载体的肉汤管不长菌为灭菌合格。同时对阳性对照载体进行活菌计数。
2 结果
2.1 对染菌载体不锈钢片的灭菌效果 每一平皿内置2片染菌的不锈钢片,盖上皿盖,放于载物架不同位置,在灭菌器满载状态下,温度设置为210℃、保温2min。试验重复5次,对不锈钢片表面的枯草杆菌黑色变种芽胞达灭菌要求表1。
表1不同保温时间对不锈钢片染菌载体的灭菌效果（P/T ）
设置210℃
保温时间（min） 灭菌器内部位
外左角 外右角 中 内左角 内右角
0.02.8
1.02.8
1.52.7
2.02.7 10/10
5/10
2/10
0/10 10/10
4/10
1/10
0/10 10/10
2/10
0/10
0/10 10/10
4/10
2/10
0/10 10/10
8/10
3/10
0/10
注:1.内数据为60℃升至设置温度的平均升温时间
2.阳性对照培养24h长菌,回收菌量为2.62×106cfu·片-1;阴性对照无菌生长,P为有菌生长管数,T为接种管数
2.2 对染菌载体器械头的灭菌效果 将染菌的器械头置于平皿内2个#皿-1,不盖皿盖,放于载物架不同位置,在灭菌器满载时,温度设置210℃、保温3min。试验重复5次,对器械头锯齿缝隙的芽胞菌达灭菌要求表2。
表2 不同保温时间对器械头染菌载体的灭菌效果P/T
设置210℃
保温时间min 灭菌器内部位
外左角 外右角 中 内左角 内右角
12.7
22.8
2.52.8
32.7 10/10
3/10
2/10
0/10 10/10
5/10
2/10
0/10 8/10
1/10
0/10
0/10 10/10
3/10
1/10
0/10 10/10
6/10
3/10
0/10
注:1.内娄据为60℃升至设置温度的平均升温时间
2.阳性对照培养24h长菌,回收菌量为2.38×106cfu·片-1;阴性对照无菌生长,P为有菌生长管数,T为接种管数
2.3 对染菌载体止血钳的灭菌效果 将2把染菌的止血钳齿端闭合放于载物架中央部位,在灭菌器满载时,灭菌温度设置210℃,保温4min。试验重复5次,均达灭菌要求表3。
表3 不同保温时间对止血钳的灭菌效果P/T
设置210℃
保温时间min 灭菌效果
12.7
22.8
32.7
42.7 10/10
5/10
2/10
0/10
注:1.内数据为60℃升至设置温度的平均升温时间
2.阳性对照培养24h长菌,回收菌量2.79×106cfu·片-1;阴性对照无菌生长,P为有菌生长管数,T为接种管数
2.4 对染菌载体骨科钳的灭菌效果 将染菌的中号重240g和小号骨科钳重100g各1把,钳咬合处闭合放于载物架中央。在灭菌器满载时,温度设置210℃,小号骨科钳保温8min可达灭菌;中号骨科钳保温12min,5次试验仍有1次有菌生长;温度设置220℃,中号骨科钳保温8min,小号骨科钳保温6min,试验重复5次,均可达灭菌要求表4。
表4 不同保温时间对中号和小号骨科钳的灭菌效果P/T
保温时间min 中 号 小 号
设置220℃
43.0
62.8
82.9
103.0
设置210℃
62.7
82.9
103.0
122.6
5/5
2/5
0/5
0/5
5/5
5/5
3/5
1/5
1/5
0/5
0/5
0/5
1/5
0/5
0/5
0/5
注:1.内数据为60℃升至设置温度的平均升温时间
2.阳性对照培养24h长菌,回收菌量2.92×106cfu·片-1;阴性对照无菌生长,P为有菌生长管数,T为接种管数
