自1948年库尔特发明了电阻抗测量技术,随着电子计算机的普及和运用,血液分析仪对血细胞计数结果的准确性和精密度有了极大提高,但对白细胞的分类难度较大,进展缓慢。直到1985年前后,对白细胞的分类从“三分类”发展到“五分类”,现简述一下它的测定原理及维护。
⒈测定原理及方法 绝大多数“五分类”分析仪采用了流式细胞分析方法。首先待测细胞经处理或染色后被压入流动室,与此同时不含细胞的缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样鞘液就能被包绕着样品高速流动组成一个圆形的流束,待测细胞在包绕下单行排列,依次通过检测区域,在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光,这两个光源信号分别反映了细胞体积的大小和内部的信息,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号,经计算机处理,可将分析结果显示在屏幕上。?测定方法包括有:(1)电阻抗和射频传导联合检测+特殊溶血剂法,目前Sysmex公司采用这种方法;?(2)激?光散射和细胞化学染色联合检测法,Technicon公司采用此方法;(3)以多角度激光偏振光散射检测法,Abbott公司采用此法;(4)阻抗与平行光散射+细胞化学染色联合检测法,ABX公司采用此法;?(5)电?阻抗+高频传导和激光散射联合检测法,Coulter公司采用此法。
⒉全自动血细胞分析仪的维护 ? 首先要充分地进行市场调研,尽可能购买知名品牌的产品。仪器的使用应具备良好的配套措施,应使用生产厂家的配套产品。此外,因仪器精密度高,对供电电源的要求较高,应配备稳压电源,高档机最好配置在线式UPS,并提供良好的接地线,对于仪器工作的环境要求空气干燥,温度应在25℃左右。?血细胞分析仪属于光机电一体化的仪器,机械运动部分较少,管道阀门却很多,因此基本掌握仪器的管路流程是维修的基础。基本要点如下:?(1)机内管道有气管和水管,正压与负压,粗细长短不尽相同。在维修过程中,如遇到更换管道应尽量使用随机配件,否则有时会造成管内压力流速的改变,而影响正常的工作状态。(2)阀门大致可分为两类:管道夹断阀和螺旋管电磁阀。前者在夹断部的专用硅橡胶管在长期使用后会因弹性变差,造成开闭不良,更换时应使用专用配件;后者在长期使用后会有内部堵塞或柱塞卡死现象发生,大部分可以拆卸内部清洗,也有内部橡胶阀片破损需要更换。(3)仪器工作所需的正负压力由内部的空压机提供,常见的故障是压力不足或真空度不够,大部分是由于管道内因其他原因引起进水所致。真空回路中设有集水瓶,维修时应检查并及时排空积水,但也有因回路中压力传感器失灵而造成失压的现象。?(4)机械运动部件常有电动与气动两种,应注意经常保养加油和除尘去垢。旋转或滑动分血阀也是运动部件,且内部还有样品血液通过,也需要经常加以清洁保养。陶瓷阀片使用的是专门的润滑油,在随机附件中有配,应妥善保管和正确使用。?(5)仪器的血红蛋白测定通道为一光电比色通道,当该通道出现问题时,首先应考虑通道中光源灯是否老化或损坏,另检查通道中540nm滤光片是否受到污染或霉变。?(6)高档血细胞分析仪的系统软件中均装有维修软件,充分掌握维修软件的各种功能,对仪器的日常维修帮助很大。如各种阀门的启闭,马达的转动,仪器的各种工作电压、温度、压力值、A/D转换值等都可能通过维修软件来检测。因此,要做好血细胞分析仪的维修保养,要求维修人员和使用人员具有一定外语水平、专业知识和计算机操作的基础知识。
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