方法
2.1 试验分5组进行，每组试验均重复3次，第1组121℃，20min；第2组121℃，18min；第3组121℃，16min；第4组119℃，20min；第5组117℃，20min。
2.2 留点温度计读数与试验规定的温度相差不超过±5℃，否则，该次试验结果无效。
2.3 将化学指示卡放于标准试验包（由3件平纹长袖手术衣，4块小手术巾，2块中手术巾，1块大手术巾，30块10cm×10cm纱布包裹成25cm×30cm×30cm大小）的中央，同时放入嗜热脂肪杆菌芽孢菌片和留点温度计。每次用9个标准试验包，每包放两张化学指示卡、两片嗜热脂肪杆菌芽孢菌片和一只留点温度计。
2.4 9个标准试验包分别放在压力蒸汽灭菌锅上前、上中、上后、中前、中中、中后、下前、下中、下后的9个位置上，连同其他待灭菌物品一起，分别经过不同灭菌温度和时间的处理。
2.5 每次灭菌结束后，立即观察化学指示卡的颜色变化和留点温度计的读数，并对其所在位置进行记录。对温度符合设定条件者，无菌操作取出标准试验包中的生物指示菌片，放入溴甲酚紫蛋白胨水培养基中。经56℃培养7天 ，观察培养基的颜色变化。同时设阴性对照和阳性对照。阴性对照为溴甲酚紫蛋白胨水培养基，阳性对照为未经灭菌处理的生物指示菌片。
2.6 溴甲酚紫蛋白胨水培养基变为黄色，表明有细菌生长，生物指示菌片指示灭菌不合格；溴甲酚紫蛋白胨水培养基为紫色，表明无细菌生长，生物指示菌片指示灭菌合格。化学指示卡卡面由黄色变为标准黑色，表明化学指示卡指示灭菌合格；化学指示卡卡面变色达不到标准黑色，则表明化学指示卡指示灭菌不合格。
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